Поиск новых генетических маркеров у пациентов с острым коронарным синдромом в зависимости от тяжести перенесённой новой коронавирусной инфекции

Новая коронавирусная инфекция (COVID-19), вызываемая РНК-вирусом SARS-CoV-2, клинически может проявляться целым спектром симптомов — от высокой температуры тела и слабости до тяжелых респираторных и сердечно-сосудистых осложнений, а также полиорганной недостаточности, приводящих к летальному исходу [1]. Несмотря на то, что для превалирующего числа больных COVID-19 проходит без видимых последствий, у ряда пациентов после перенесенной COVID-19 регистрируют появление различных симптомов (нарастание одышки, астенический синдром (слабость), бессонница, учащенное сердцебиение и повышение артериального давления), сохраняющихся на протяжении длительного периода времени [2]. По данным Всемирной организации здравоохранения после острой фазы COVID-19 у 10-20% пациентов развивается постковидный синдром — сохраняющиеся или впервые выявленные симптомы, наблюдаемые в течение нескольких месяцев и более [2][3]. Следует отметить, что высокий риск госпитализации и летального исхода у лиц, перенесших COVID-19, связан с наличием артериальной гипертензии или других сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) [1][4][5]. Более того, в скором времени ожидается рост числа впервые выявленных ССЗ у таких больных, что окажет негативное влияние не только на уровень заболеваемости и распространенности болезней системы кровообращения, но и на экономические прогнозы [1].

Острый коронарный синдром (ОКС) является одним из самых грозных сердечно-сосудистых событий, приводящих к летальному исходу [6]. Недостаточная изученность особенностей клинического течения ОКС у больных, перенесших COVID-19, диктует необходимость поиска возможных предикторов тяжелого течения и неблагоприятного прогноза у таких пациентов. На наш взгляд, одними из самых перспективных маркеров (предикторов) являются генетические. Ряд из них мы описали в наших предыдущих работах [7-9].

Поскольку одну из ключевых ролей в патогенезе COVID-19 играет ренин-ангиотензин-альдостероновая система, где ангиотензинпревращающий фермент катализирует синтез ангиотензина II из ангиотензина I, который, в свою очередь, связываясь с рецептором AT1, вызывает вазоконстрикцию, фиброз, воспаление и тромбоз, факторы, влияющие на экспрессию и функции компонентов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, могут помочь спрогнозировать риск развития неблагоприятных событий у пациентов, перенесших COVID-19 [10].

В литературе описаны полиморфизмы гена ангиотензинпревращающего фермента (ACE), связанные с высоким риском развития артериальной гипертензии, ССЗ, почечной недостаточности и заболеваний лёгких [11]. Так, у лиц с генотипом D/D наблюдались самые высокие уровни ACE в крови. Такая повышенная экспрессия может объяснить более высокий риск ССЗ и респираторных заболеваний у лиц, гомозиготных по делеции (D) [11].

В одной из своих предыдущих работ мы выявили взаимосвязь между наличием варианта нуклеотидной последовательности (ВНП) rs1799752 (I/D) гена ACE и развитием ОКС у пациентов, перенёсших COVID-19 [7].

Целью нашего нового исследования стало оценить частоту обнаружения генотипов ВНП rs1799752 гена ACE у пациентов с ОКС в зависимости от степени тяжести перенесённой COVID-19.

Материал и методы

Клинико-анамнестические характеристики

Дизайн исследования был разработан на основе дизайна, представленного в нашей ранее опубликованной работе [7], и адаптирован для текущей цели.

Исследуемая выборка включает 100 пациентов, из них 50 мужчин и 50 женщин. Средний возраст мужчин составил 54,1±8,2 лет, женщин — 58,7±5,2 лет.

Всем пациентам проводилась чрескожная транслюминальная коронарная ангиопластика со стентированием. Вмешательство выполнялось на ангиографической установке "CAS-10" (General Electric optima igs 330, США) с фиксацией изображения на компьютере [7].

Наличие перенесенной COVID-19 подтверждали повышенным уровнем IgG в крови и указанием в карте пациента информации о подтверждении диагноза ранее перенесенной COVID-19 с помощью результата теста полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Критерии исключения из исследования [7]: терминальные стадии печеночной и почечной недостаточности, психические расстройства, алкогольный делирий, наркомания, онкопатология III-IV стадий, наличие вируса иммунодефицита человека.

Методика генотипирования инсерционного полиморфизма также подробно представлена в нашей предыдущей работе [7]: через синтез соответствующего фрагмента ДНК гена АСЕ методом ПЦР и анализ длины продуктов. Продукт ПЦР в виде фрагментов амплифицированной ДНК: 597 пар нуклеотидов (I аллель) и 319 пар нуклеотидов (D аллель) был визуализирован методом гель-электрофореза.

Статистический анализ проводился с помощью пакета программ SPSS 17.0.5. Сравнение по качественным параметрам проводили с использованием критерия χ². Оценивали отношение шансов с 95% доверительным интервалом для каждой переменной.

Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России (протокол № 152 от 25.05.2023, г. Новосибирск). От каждого пациента получено информированное согласие на участие в исследовании в соответствии с этическими требованиями Всемирной организации здравоохранения. Все диагнозы устанавливались в соответствии с критериями, представленными в действующих клинических рекомендациях.

Результаты

Первым этапом при тщательном сборе анамнеза были выявлены варианты штаммов COVID-19 у пациентов с ОКС: вариант Альфа (апрель-декабрь 2020г) — 8 пациентов (6,8%), вариант Дельта (2021г) — 23 пациента (19,5%), Омикрон (январь-апрель 2022г) — 87 пациентов (73,7%). Данные представлены в таблице 1. Таким образом, в нашем исследовании чаще встречались пациенты, переболевшие штаммом Омикрон.

Вторым этапом определялась степень тяжести перенесённой COVID-19 у пациентов с ОКС. Тяжёлая степень регистрировалась у штамма Дельта — 7 человек (5,93%); средняя степень тяжести регистрировалась у штамма Омикрон — 1 человек (0,85%), штамма Дельта 16 человек (13,6%), штамма Альфа — 4 человека (3,4%). Результаты показаны в таблице 2.

Третьим этапом всем пациентам определяли ВНП rs1799752 гена ACE с помощью ПЦР. Известно, что амбулаторно легкую и среднюю степень тяжести COVID-19 лечили 83 пациента, госпитализированы с тяжёлой и средней степенью тяжести были 17 пациентов с COVID-19. Данные представлены в таблице 3. По результатам генетического исследования, у пациентов с перенесённой COVID-19, кто лечились амбулаторно, генотип ID выявлен у 37 человек (44,6%), генотип II выявлен у 24 пациентов (28,9%), генотип DD выявлен у 22 пациентов (26,5%). Среди пациентов, кто был госпитализирован с COVID-19, генотип II выявлен у 6 пациентов (35,3%), генотип ID выявлен у 7 пациентов (41,2%), генотип DD выявлен у 4 пациентов (23,5%), соответственно. Таким образом, носительство гетерозиготного генотипа ID в общей группе среди амбулаторно лечившихся и госпитализированных пациентов было выше частот носительства гомозиготных генотипов II и DD.

При разделении по полу, среди мужчин, лечившихся амбулаторно, генотип II встречался у 12 пациентов (27,9%), генотип ID у 22 пациентов (52,2%), генотип DD у 9 пациентов (20,9%). Среди госпитализированных мужчин с COVID-19, генотип II встретился у 1 пациента (14,3%), генотип ID был обнаружен у 2 пациентов (28,6%), генотип DD встретился у 4 пациентов (57,1%). Среди женщин, лечившихся амбулаторно с генотипом II было выявлено 12 пациенток (30,0%), с генотипом ID — 15 пациенток (37,5%), с генотипом DD — 13 пациенток (32,5%). В отношении женщин, госпитализированных в стационар с COVID-19, генотип II был выявлен у 5 (50,0%), генотип ID был выявлен у 5 (50,0%), генотипа DD выявлено не было. По гендерному признаку, среди амбулаторно лечившихся мужчин и женщин, гетерозиготный вариант также встречался чаще, так же как и среди женщин, госпитализированных с COVID-19.

Распределение частот генотипов соответствовало равновесию Харди-Вайнберга (Chi²=0,043).

Обсуждение

В нашем исследовании чаще всего наблюдалось носительство генотипа ID rs1799752 гена АСЕ среди пациентов с ОКС в зависимости от степени тяжести перенесённой COVID-19. В российских исследованиях встречаются и другие ВНП среди пациентов с ОКС, ассоциируемые с перенесенной COVID-19 [8][9].

Ученые других стран также исследовали ассоциацию ВНП с ССЗ. Так, мексиканскими исследователями в течение 2 лет проводилось многоцентровое перекрёстное исследование, целью которого было выявление взаимосвязи между степенью тяжести COVID-19 и ССЗ [12]. У всех пациентов, включенных в исследование, была подтверждена перенесенная COVID-19 в анамнезе, а в числе сопутствующих заболеваний регистрировались артериальная гипертензия и сахарный диабет 2 типа. Среди мужчин данной когорты пациентов была установлена связь между аллелем Т rs2285666 гена ACE2 и тяжестью развития COVID-19, а именно тяжелой степенью и критически тяжёлой степенью [12].

Немецкими учеными изучались ассоциации ВНП гена ACE2 с тяжестью COVID-19 [13]. Выявлено, что носители аллеля G rs2285666 гена ACE2 чаще имели либо летальный исход, либо тяжёлую степень течения COVID-19.

В других зарубежных исследованиях ВНП гена ACE показан ряд ассоциаций с различными гетерозиготами и гомозиготами в зависимости от тяжести течения COVID-19 [14].

С другой стороны, в исследовании PROGRESS ученые не увидели связи с развитием сердечно-сосудистой или цереброваскулярной патологии в зависимости от носительства различных генотипов гена ACE [15].

Как видно из обсуждения, результаты генетических исследований весьма неоднозначны и могут говорить о том, что в зависимости от численности исследуемых групп, расы, климатических условий, особенностей рабочей деятельности, результаты могут отличаться. Также стоит отметить важность изучения не только одного полиморфизма, но и генетической группы в целом. Возможно, именно тогда будут получены ответы на ключевые вопросы в диагностике и лечении пациентов с ОКС, перенесших COVID-19 различной степени тяжести.

Заключение

Описана взаимосвязь носительства ВНП rs1799752 (I/D) гена ACE с развитием ОКС и степенью тяжести перенесённой COVID-19, в т.ч. с учетом штаммов COVID-19. Поиск генетических маркеров, способных спрогнозировать тяжесть течения и исходы ОКС у пациентов, перенесших COVID-19, в долгосрочной перспективе поможет выявить группы риска, разработать персонализированные подходы к профилактике, лечению и реабилитации, а также улучшить прогнозирование исходов у таких пациентов.

Отношения и деятельность: все авторы заявляют об отсутствии потенциального конфликта интересов, требующего раскрытия в данной статье.